3.微珠芯片技术
微珠芯片技术(beadarray) 技术是一一种新的基因芯片技术,有可能成为今后基因芯片技术发展的方向。目前,微珠芯片技术在生命科学领域的用途主要集中在SNP及基因型分析、基因表达谱分析和蛋白组学研究三大领域。微珠芯片技术是在光导纤维技术基础上发展起.来的技术。在直径为3. 5mm的光纤束中,包含约50000跟光纤。
微阵列芯片是指采用光导原位合成或微量点样等方法,将大量生物大分子比如核酸片段、多肽分子甚至组织切片、细胞等生物样品有序地固化于支持物(如玻片、尼龙膜等载体)的表面,组成密集二维分子排列,然后与已标记的待测生物样品中靶分子反应,通过特定的仪器,比如激光共聚焦扫描仪或电荷偶联摄影像机对反应信号的强度进行快速、并行、地检测分析,从而判断样品中靶分子的数量。
按照芯片上的探针对微阵列芯片进行分类,有核酸芯片、蛋白质芯片和组织芯片等,目前应用泛的是核酸芯片,核酸芯片又有两种类型,分别是cDNA微阵列和寡核苷酸微阵列。
cDNA基因文库由PCR产物组成,为双链结构,长度一般在数百至数千碱基对,因而芯片的杂交条件对每个基因不能保证是的,假阳性率较高,因此,判定cDNA微阵列的终结果时,有必要对筛选出的基因进行测序。在应用cDNA微阵列进行研究时,一般需要提供一个对照样本,将其与需要研究的标本给予不同的标记,将二者灯亮混合后共同注入芯片进行孵育。扫描后得到的原始数据是各个单元格中信号强度的比率。
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