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舟山细胞增殖免费咨询「在线咨询」什么是实事求是

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最后更新: 2024-01-05 15:33
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详细说明
5分钟前 舟山细胞增殖免费咨询「在线咨询」[英瀚斯2eefa30]内容:

细胞增殖检测

本公司应用MTT比色法, 检测细胞存活和生长。其检测原理为huo细胞内线粒体中的琥珀酸脱氢酶能催化外源性无色的MTT形成蓝色的结晶Formazan,并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二jia基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的Formazan,用酶联mian疫检测仪在一定波长处测定其光吸收值,可间接反映huo细胞数量。7%的琼脂糖和2xDMEM培养基在无菌试管中相混以后,再向管中加入0。在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。

该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿liu药wu筛选、细胞毒性试验、以及肿liu放she敏感性测定等。服务内容 1. 细胞接种:收到客户细胞后,我们会用细胞计数板计数细胞,得出细胞悬液浓度。透射电镜观察自噬小体方法利用光学显微镜,借助相应的染色方法,可以观察细胞凋亡时会出现的一系列形态特征。计算出应稀释的倍数,按MTT试剂盒要求在96孔板内接种 相应浓度的细胞悬液;

2. 细胞培养:然后在无菌恒温细胞培养箱内培养接种好的96孔细胞培养板,并实时观察细胞状态;

3. yao物处理并呈色:按不同浓度梯度加入yao物作用细胞;

4. 溶解,比色:加入MTT检测试剂,按操作要求孵育相应时间,在mei标仪内检测对照组和实验组的吸光值。并处理数据得出比色结果。

脂质体瞬时转染

1、细胞H9C2 (Hela) 6孔板Hela1x10°/孔。

2、转染前换上没有抗sheng素的DMEM+胎清(10%)。

3、将质粒DNA (约2-4ul) 2ul 加入dorf管中+DMEM至50u1。

4、脂质体5ul补培养基至50ul混匀静止5分钟(质粒与脂质体比例为1:2或1.5:2.5)。

5、将含有脂质体的培养基与含质粒的混合总体积100ul室温放置30分钟。

6、吸取混合物均匀加入每一个孔中。

7、将6孔板放入培养箱中继续培养6小时后吸出培养基换上新配置的培养基DMEM6ml+胎清600u1+三抗300u1。

8、培养24小时。

细胞分化

细胞分化是指同一来源的细胞逐渐产生出形态结构、功能特征各不相同的细胞类群的过程,其结果是在空间上细胞产生差异,在时间上同一细胞与其从前的状态有所不同。细胞分化的本质是基因组在时间和空间上的选择性表达,通过不同基因表达的开启或关闭,终产生标志性蛋白质。结果:30%percoll密度梯度离心前CD117(c-kit)阳性细胞占13。细胞诱导是指将一群不同类型或者形态结构、功能特征存在差异的细胞通过生物学、物理学等手段,将之转变为具有相似/相同形态结构、功能特征的细胞群体的过程。

关于细胞培养的常见问题:

Q: 细胞在培养过程中出现碎片如何处理?

A: 贴壁细胞在移除原培养液后,用 PBS 冲洗 2-3 遍;悬浮细胞离心移除原培养液后,加入 PBS 重悬,离心移除 PBS; 一般建议重复上述步骤 2-3 遍,用 800-1000rpm 离心 3-5 分钟。

Q:细胞冻存能放在 -80℃ 保存吗?

A:长期保存的细胞应当放在液氮(-196℃)中保存,短时间(一般 1 周-2 周)可以存放在 -80℃。

Q:培养瓶是用密封盖好,还是用透气盖好?

A:都可以。只是在使用密封盖培养瓶时,瓶盖旋至约 2/3,不要完全拧紧,预留约 1/3 以便细胞可以透气;有些品牌的密封盖培养瓶的瓶盖上有适合位置指示标志。

Q:何谓 FBS,FCS,CS,HS?

A: Fetal bovine serum(FBS)和 Fetal Calf Serum(FCS)之间没有区别,都是指胎牛;FCS 不是正规命名,尽量不使用。Calf Serum(CS)则是指小牛。Horse Serum(HS)则是指马。

原文链接:http://www.ybxx.org/caigou/10791.html,转载和复制请保留此链接。
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